UOP荧光指示剂是一种检测细胞内钙离子的荧光试剂

　　UOP荧光指示剂是一种检测细胞内钙离子的荧光试剂。Fluo3若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与钙离子Ca2+结合后荧光会增加60至80倍，是目前常用的一种钙离子荧光探针。激光共聚焦荧光显微镜具有氩激光器，所以Fluo3可被广泛使用于这种显微镜上。这种荧光信号发出来的长波也便于减小对样品细胞的光损伤。Fluo3也可用来检测紫外光照射下可裂解的熬合钙或其它形式的钙。Fluo3-AM是Fluo3的一种乙酰甲酯衍生物，通过培养，能够轻易进入细胞中。3-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo3，从而被滞留在细胞内。Fluo3可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，激发波长为506mm，发射波长为526mm。

 

　　UOP荧光指示剂作用原理：

　　在实际工作中，肉眼是难以准确地观察出指示剂变色点颜色的微小的改变。人们目测酸碱指示剂从一种颜色变为另一种颜色的过程，只能在一定的pH变化范围内才能发生，即只有当一种颜色相当于另一种颜色浓度的十倍时才能勉强辨认其颜色的变化。在这种颜色变化的同时，介质氢灭菌生物指示剂的pH值则由一个值变到另一个值。

 

　　可见溶液的颜色是在从pH=pKHIn-1到 pH=pKHIn+1的范围内变化的，这个范围称为指示剂的变色范围即变色域。在变色范围内，当溶液的pH值改变时，碱色成分和酸色成分的比值随之改变，指示剂的颜色也发生改变。超出这个范围，如pH≥pKHIn+1时，看到的只是碱色；而在pH≤pKHIn-1时，则看到的只是酸色。因此指示剂的变色范围约2个pH单位。由于人的视觉对各种颜色的敏感程度不同，加上在变色域内指示剂呈现混合色，两种颜色互相影响观察，所以实际观察结果与理论值有差别，大多数指示剂的变色范围小于2个PH单位。